在化学实验中，点样是将待测样品溶液精确施加到薄层板（如硅胶板、氧化铝板）上的关键步骤，其质量直接影响后续分离与分析结局的准确性。下面内容是点样的操作要点及注意事项：
一、点样前的准备职业
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设备与材料选择
- 点样设备：根据实验需求选择手动或自动点样工具。手动常用定量毛细管（0.5-5μL）或微量注射器，自动化设备（如CAMAG Linoamt IV型）可实现高精度带状或点状点样。
- 薄层板：根据样品性质选择硅胶板、氧化铝板等，使用前需检查板面是否平整、无污染。
- 溶剂与样品：样品溶液需稀释至合适浓度（通常0.01%-1.00%），溶剂应选择低粘度、易挥发的类型（如甲醇、乙醇），避免残留干扰展开剂选择性。
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参数设置
- 点样体积：经典薄层板点样量1-5μL，高效薄层板100-500nL。
- 点样间距：经典薄层板1-2cm，高效薄层板0.5cm。
- 起始线位置：距薄层板底边1.5cm（经典）或1cm（高效）。
二、点样操作步骤
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手动点样（毛细管/注射器）
- 垂直轻触薄层板表面，避免破坏吸附剂层。
- 控制点样直径≤3mm（经典板）或1-2mm（高效板），多次点样时需待前次溶剂挥发完全。
- 若样品浓度低，可多次点样并吹干，但需避免原点扩散形成“环形色谱效应”。
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自动点样仪操作
- 校准设备，设置点样模式（点状/带状）、体积及速度。
- 带状点样适用于大体积样品（如1-99μL），通过氮气吹落溶液形成窄带，进步分辨率。
- 检查点样均匀性，确保无拖尾、污染或重叠。
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独特样品处理
- 高粘度或大体积（＞100μL）样品可使用接触点样法（如Clarke Contact Spotter），通过抽气浓缩后转移至薄层板。
- 挥发性样品需快速点样并立即展开，防止挥发损失。
三、点样后的处理与注意事项
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干燥与展开
- 点样后需完全挥发溶剂，避免残留影响展开剂选择性和斑点形状。
- 展开剂液面需低于样品原点，防止溶解样品。
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质量控制
- 展开前用紫外灯检查斑点是否均匀，避免超载导致的拖尾或重叠。
- 定量分析需保证点样重复性，可借助扫描仪（如CAMAG Scanner II）验证斑点精度。
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安全与维护
- 穿戴防护装备（手套、护目镜），避免接触有毒试剂。
- 点样针使用后需彻底清洗，防止交叉污染；设备定期润滑维护（如丝杠、轨道）。
四、常见难题与解决方案
| 难题 | 缘故 | 解决技巧 |
|---|---|---|
| 斑点拖尾 | 点样量过大或溶剂残留 | 减少体积，确保溶剂完全挥发 |
| 边缘效应 | 点样靠近薄层板边缘 | 保持距边缘≥3mm |
| 环形色谱效应 | 溶剂洗脱能力过强 | 改用弱极性溶剂 |
| 自动点样仪堵塞 | 针头残留或气泡 | 清洗管路，排空气泡 |
通过合理选择设备、控制参数并遵循操作规范，可显著进步点样精度和实验结局的可靠性。若需进一步优化，可参考具体仪器的操作手册（如CAMAG系列设备）。
